中 華 人 民 共 和 國 行 業(yè) 標(biāo) 準(zhǔn)
化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法總則
Standard methods of microbiological examination for
cosmetics
General rules
1 樣品的采集及注意事項
1.1所采集的樣品，應(yīng)具有代表性，一般視每批化妝品數(shù)量大小，隨機(jī)抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。檢驗時，應(yīng)分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10g或10ml。包裝量小的樣品，取樣量可酌減。
1.2供檢樣品，應(yīng)嚴(yán)格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有破裂，在檢驗前不得啟開，以防再污染。
1.3接到樣品后，應(yīng)立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗，樣品應(yīng)放在室溫陰涼干燥處，不要冷藏或冷凍。
1.4若只有一個樣品而同時需做多種分析，如細(xì)菌、毒理、化學(xué)等，則宜先取出部分樣品作細(xì)菌檢驗，再將剩余樣品作其他分析。
1.5在檢驗過程中，從開封到全部檢驗操作結(jié)束，均須防止微生物的再污染和擴(kuò)散，所用器皿及材料均應(yīng)事先滅菌，全部操作應(yīng)在無菌室內(nèi)進(jìn)行。或在相應(yīng)條件下，按無菌操作規(guī)定進(jìn)行。
1.6如檢出糞大腸菌群或其他致病菌，自報告發(fā)出起該菌種及被檢樣品應(yīng)保存一個月奮查。
2 供檢樣品的制備
2.1培養(yǎng)基和試劑
2.1.1生理鹽水
氯化鈉 8.5g、蒸餾水 1000ml 溶解后，分裝到加玻璃珠的錐形瓶內(nèi)，每瓶90ml，121℃（151b）20min高壓滅菌。
2.1.2SCDLP液體培養(yǎng)基
成分：
酪蛋白胨 17g、大豆蛋白胨 3g、氯化鈉 5g、磷酸氫二鉀 2.5g、葡萄糖 2.5g、卵磷脂 1g、吐溫80 7g、蒸餾水 1000ml
制法：將上述成分混合后，加熱溶解，調(diào)pH為7.2?.3分裝，121℃（151b）20min高壓滅菌。注意振蕩，使沉淀于底層的法溫80充分混合，冷卻至25℃左右使用。
注：如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用日本多胨代替。
2.1.3滅菌液體石蠟。
2.1.4滅菌吐溫80。
2.2儀器
2.2.1天平.
2.2.2滅菌的錐形瓶:內(nèi)含玻璃珠及90ml稀釋液.
2.2.3滅菌刻度吸管:10ml、5ml。
2.2.4水浴箱。
2.2.5滅菌研體及滅菌研棒。
2.2.6均質(zhì)器。
2.3不同類型樣品的檢樣制備。
2.3.1液體樣品
2.3.1.1水溶性的液體樣品，可量取10ml加到90ml滅菌生理鹽水中，如樣品不少于10ml。仍按10倍稀釋法進(jìn)行。如為5ml則加45ml滅菌生理鹽水，混勻后，制成1：10稀釋液。，
2.3.1.2油性液體。取樣品10ml，先加5ml來菌液體石蠟混勻，再加10ml滅菌的吐溫80，在40~44℃水浴中振蕩混合10min，加入滅菌的生理鹽水75ml（在44~44℃水浴中預(yù)溫），在40~44℃水浴中乳化，制成1：10的懸液。
2.3.2膏、霜、乳劑半固體狀樣品
2.3.2.1親水性的樣品，稱取10g，加到滅菌的帶玻璃珠加有90ml滅菌生理鹽水的錐形瓶中，充分振蕩混勻，放32℃水浴靜置15min。用其上青液作為1：10的稀釋液。
2.3.2.2疏水性的樣品，稱取10g，放到滅菌的研缽中，加10ml滅菌液體石蠟，研磨成粘稠狀，再加10ml滅菌吐溫80，研磨待溶解后，加70ml滅菌生理鹽水，在40~44℃水浴充分混合，制成1：10稀釋液。
2.3.2.3固體樣品，稱取10g，加到滅菌的生理鹽水稀釋瓶中，振蕩混勻，使其分散混懸后，放30~32℃水浴中，15min后取出，充分振蕩混合，再放到30~32℃水浴中靜置15min，取上清液作為1：10的稀釋液。
如有均質(zhì)器，上述水溶性膏、霜、粉劑等，可稱10g樣品加到90ml滅菌生理鹽水，均質(zhì)1~2min；疏水性膏、霜及眉筆、口紅等，稱10g樣品加到90MLSCDLP液體培養(yǎng)基，或1g樣品加1ml滅菌液體石蠟、1ml滅菌吐溫80、7ml滅菌生理鹽水，均質(zhì)3~5min。
說明：
本標(biāo)準(zhǔn)由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測所歸口。
本標(biāo)準(zhǔn)由“化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法”起草小組起草。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人周淑玉。
本標(biāo)準(zhǔn)由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測所負(fù)責(zé)解釋
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